Лабораторная диагностика кори

15.02.2020 @pediatrics_rus Нет комментариев

Для постановки диагноза корь зачастую необходимо лабораторное подтверждение инфекции. Самое лучшее время для сдачи анализов — первый контакт пациента с врачом. Врача необходимо вызывать на дом, так как корь — это заразное заболевание и поход в поликлинику может стать причиной заражения многих восприимчивых детей и взрослых. Забор материала для исследования может выполнить врач или медсестра, которую доктор может прислать чуть позже.

1 больной корью может заразить 12—18 восприимчивых человек [1]. Подробнее в статье «Как можно заразиться корью?».

Стандартом лабораторной диагностики кори в большинстве стран являются серологическое исследование и ПЦР-диагностика.

1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Суть метода заключается в идентификации РНК вируса кори в крови, слизи носоглотки/ротоглотки, бронхиальном секрете или моче.

ПЦР-исследование рекомендуется проводить как можно раньше после появления сыпи, так как количество вируса в организме снижается с течением времени. Наиболее информативным является период первых 1—3—7 дней от начала высыпаний [2—5]. В литературе имеются сведения о том, что у некоторых пациентов вирус кори может определяться в носоглоточном секрете до 10—14 дня болезни [5].

Для наиболее точной диагностики рекомендуется производить забор материала из трех разных локусов (кровь, мазок из носоглотки или ротоглотки и моча). Это повышает вероятность правильного диагноза [4,5].

После забора материала для ПЦР (мазок и моча) допустимо его хранение до 1 суток в холодильнике (4 °С), возможно замораживание. Если для исследования используется моча, то ее объем должен быть не менее 10 мл, но лучше 50 мл. Утренняя первая моча содержит максимальное количество вируса [4].

Отрицательный результат ПЦР не исключает диагноза кори [6].

Ложноотрицательный результат может быть получен при позднем заборе материала (более 3—7 дней с момента появления сыпи), предшествующей недавней вакцинации против кори, при нарушениях хранения и/или транспортировки образцов [4,5].

В соответствии с международными рекомендациями при выполнении ПЦР желательно определять генотип вируса кори. Это необходимо для четкого различения происхождения вируса (дикий штамм или вакцинный), учета распространения вируса по земному шару и происхождения очагов/вспышек заболевания [4].

На сегодняшний день известно 24 генотипа вируса кори. Большинство из них вышло из циркуляции, однако менее 10 из них (по данным ВОЗ — 6 [7]) все еще присутствуют на нашей планете [8].

2. Серологический метод.

Метод заключается в определении специфических антител (IgM и IgG) против вируса кори в сыворотке крови.

Для верификации диагноза кори достаточно определить один класс антител IgM или IgG. Каковы особенности анализа?

IgM.

IgM определяется в крови в течение 1 месяца (28 дней [3]) у больного корью после появления высыпаний. Пик IgM отмечается на 7—10 сутки от момента появления сыпи, а затем количество антител постепенно снижается. Через 6—8 недель от начала сыпи IgM уже может не определяться [9].

Если больной ранее прививался против кори (1 или 2 прививки) то при реинфекции вирусом кори IgM у него может не определяться вовсе или быть повышенным только короткий промежуток времени, который трудно зафиксировать [6].

Отрицательный анализ на IgM не исключает наличие заболевания у ранее привитых.

В некоторых случаях у ранее не привитых пациентов IgM может быть ложноотрицательными (около 20—25% проб). Это характерно для образцов, взятых в первые 72 часа от начала появления сыпи. Дело в том, что концентрация антител в первые дни болезни еще мала и недостаточна для определения [10,11].

Если результат был отрицательным и сыпь присутствует более 72 часов должен быть выполнен повторный анализ (допустимо выполнить анализ до 10 дня болезни) [6].

Кроме того, ложноотрицательный результат может быть получен, если анализ выполнен позже 28 дней с момента появления сыпи.

Ложноположительный результат возможен при проведенной ранней вакцинации против кори (в течение предшествующих 6 недель до появления сыпи), наличии повышенного ревматоидного фактора, при сопутствующих острых воспалительных заболеваний [5].

В каждом отдельном случае проводится изучение течения заболевания, особенностей пациента и/или дополнительная диагностика.

Наряду с определением IgM / IgG для диагностики кори, также настоятельно рекомендуется выполнять ПЦР [12].

Положительный анализ на IgM только при наличии характерной клинической картины и данных о контакте с больным корью свидетельствует об остром течении коревой инфекции. Положительный анализ на IgM при отсутствии характерной клинической картины или контакта с больным корью не является основанием для постановки диагноза. В таких случаях рекомендуется выполнить ПЦР исследование [3]. 

IgG.

Определение IgG является информативным анализом для подтверждения кори в случае отсутствия возможности провести ПЦР исследование и/или когда IgM является отрицательным или сомнительным [6].

Исследование проводится в парных сыворотках: первый анализ должен быть выполнен в первые 4—7 дней от начала высыпаний, второй — в течение 10—30 дней после первого [2,3].

IgG достигают пика через 4 недели от начала сыпи [9].

Положительным результат считается, если:

— произошла сероконверсия (в первом анализе IgG отрицательны, во втором — положительны);

— отмечается значительное (в 4 и более раз) повышение уровня IgG.

Сероконверсия не является информативной при недавно проведенной вакцинации (в течение предшествующих 6 недель).

Ранее вакцинированные, получившие две прививки и не выработавшие защитных антител (такое встречается, но очень редко), при заболевании корью могут не иметь повышение IgG в 4 раза при втором анализе IgG по сравнению с первым [3]. Отрицательное значение IgG в двух анализах исключает наличие коревой инфекции.

ИФА — метод, одобренный ВОЗ для определения IgG и IgM для диагностики коревой инфекции [10].

3. Вирусологический метод.

Для идентификации вируса кори иногда может применяться вирусологический метод. Суть его заключается в том, что вирус, полученный от больного, культивируется в клеточной культуре. Этот метод является особо точным, но занимает около двух недель. Вирусологический метод не рекомендуется для рутинного обследования при подозрении на корь [2,5,6,8].

Список источников

[1] Strebel PM, Orenstein WA. Measles. N Engl J Med. 2019 Jul 10; 381:349-357. DOI: 10.1056/NEJMcp1905181.

[2] Профилактика кори, краснухи и эпидемического паротита. Санитарно-эпидемиологические правила СП 3.1.2952-11; 2011.

[3] An Advisory Committee Statement Measles and Rubella Elimination Working Group. Guidelines for the Prevention and Control of Measles Outbreaks in Canada. Can Commun Dis Rep 2013;39. DOI:10.14745/ccdr.v39i00a03.

[4] Alternative specimens for IgM antibody testing. In: Manual for the Laboratory-based Surveillance of Measles, Rubella, and Congenital Rubella Syndrome. 3rd edition. WHO; 2018. Available at: https://www.who.int/immunization/monitoring_surveillance/burden/laboratory/manual_section3.4/en/ (December 2019).

[5] Gastanaduy PA, Redd SB, Clemmons NS et al. Measles. In: Roush SW, Baldy LM, Hall AK. Manual for the Surveillance of Vaccine-Preventable Diseases. Centers for Disease Control and Prevention Department of Health and Human Services. Last reviewed: 2019. Available at: https://www.cdc.gov/vaccines/pubs/surv-manual/chpt07-measles.html. (December 2019).

[6] American Academy of Pediatrics. Masles. In: Kimberlin DW, Brady MT, Jackson MA, Long SS, editors. Red Book: 2018-2021 Report of the Committee on Infectious Diseases. 31th ed. American Academy of Pediatrics; 2018. pp. 537–50.

[7] The clinical description and complications of measles. In: Manual for the Laboratory-based Surveillance of Measles, Rubella, and Congenital Rubella Syndrome. 3rd edition. WHO; 2018. Available at: https://www.who.int/immunization/monitoring_surveillance/burden/laboratory/manual_section1.2/en/ (December 2019).

[8] PHE National Measles Guidelines. Public Health England. 2019. Available at: https://www.gov.uk/government/publications/national-measles-guidelines (December 2019).

[9] Infection, immune response and laboratory diagnosis of measles. In: Manual for the Laboratory-based Surveillance of Measles, Rubella, and Congenital Rubella Syndrome. 3rd edition. WHO; 2018. Available at: https://www.who.int/immunization/monitoring_surveillance/burden/laboratory/manual_section1.3/en/ (December 2019).

[10] Best practices for serum specimens for measles and rubella IgM detection. In: Manual for the Laboratory-based Surveillance of Measles, Rubella, and Congenital Rubella Syndrome. 3rd edition. WHO; 2018. Available at: https://www.who.int/immunization/monitoring_surveillance/burden/laboratory/manual_section3.3/en/ (December 2019).

[11] Gershon AA. Measles Virus (Rubeola). In: Bennett JE, Dolin R, Blaser MJ, editors. Mandell, Douglas, and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases. 9th edition. Elsevier;2020. pp. 2110—16.

[12] Laboratory Recommendations. Accelerating Progress towards Measles/Rubella Control and Elimination Goals. The 14th Global Measles and Rubella Laboratory Network Meeting, Geneva, 21-23 June 2016. Available at: https://www.who.int/immunization/monitoring_surveillance/burden/laboratory/MR_labnet_Recommendations_2016.pdf?ua=1. (December 2019).

Добавить комментарий